我们都知道干细胞是十分脆弱的,培养干细胞大多使用胎牛血清来完成实验。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。优良的胎牛血清不仅为细胞提供细胞生产提供不可替代的营养成分,也会让细胞培养实验更轻松。提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。胎牛血清可以提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。RPMI 1640 Medium生产厂家
胎牛血清和新生牛血清的区别是什么?取血年龄不同:牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹得来的胎牛。国产胎牛血清(并无明确定义,但通常以此称)的指的是出生4-6小时,且未进行哺乳(unsuckled)进食的牛,有时还称作国产新生牛。新生牛血清(NewbornCalfSerum,简称NBCS)指的是出生14天-3个月进行取血的牛。成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。宁波Biochannel培养基胎牛血清免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。
胎牛血清工艺流程:从血源采集、加工、过滤、辐照处理、包装、质检,再到物流,遵循行业更高标准,大范围保驾护航,确保产品高等、可信赖。可追溯性,产品制备所用材料均来自澳大利亚。采集血清的牛的出生、饲养、运输或屠宰场所均不经过疯牛病(BSE)疫区,原料均通过严格标准采自中国许可的澳大利亚非蓝舌病毒(BTV)地区。每批次均附有含原产地信息的分析证书(CoA)。原材料加工,血液取自澳大利亚地区受国家监管的工厂。全血使用严格的无菌采集技术收集,然后在可控条件下凝结。离心后收集血清并立即冻存。过滤和包装,冻存的血清原料在可控条件下解冻,然后通过一系列不同孔径的膜过滤,并在封闭系统中进行分装。血清包装入无菌带刻度的塑料瓶后,密封冻存于-10~-40°C环境。
如何避免血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
什么是优良的胎牛血清?外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采集血液的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。胎牛血清对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。Biochannel培养基直销
胎牛血清应该存放在-20℃环境的地方。RPMI 1640 Medium生产厂家
胎牛血清给细胞提供的益处主要体现在6个方面:1、提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。2、提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。3、天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分,促进细胞的附着、铺展。4、提供消毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白,对多种重金属有高度亲和性,并可清理细胞生长环境中的氧自由基(·O),具有很强的抗氧化活性,可防止细胞衰老。5、提供酸碱度缓冲的作用,以及维持渗透压。6、提供蛋白酶抑制剂,使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时,常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。RPMI 1640 Medium生产厂家
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